转载@孙学军：人体细胞常常处于氧化应激状态，这源于过量自由基即活性氧的异常氧化潜力。急性氧化可来自各种状态，例如强力运动、炎症、缺血再灌注性损伤、出血、组织移植等。慢性持续性氧化应激与许多生活方式相关性疾病、老化和癌症密切相关。但是，临床上虽然有许多试验性抗氧化品，但或者剂量小不会发生效果，或者因其剂量大，其毒性高，无法使用。寻找无毒或少毒性抗氧化剂用于治疗许多疾病，一直是梦寐以求的工作

近几十年，经过不懈的努力，人们终于发现氢（H2），一种可燃性无色无味气体，是一种无毒、天然、简便、有效的选择性抗氧化分子。1976年Dole等报告H2 对皮肤鳞状细胞癌的治疗作用。此后，有报告吸氢可治疗肝脏寄生虫感染引起的肝炎。2007年日本东京医科大学的研究者发现，H2 具有抗氧化特性，能选择性中和氢氧根(•OH )和过氧硝基(ONOO-)，保护脑免受辐射和中风的伤害。

气体对疾病具有治疗作用，不是一个新概念。氧气是人类生存不可缺少的物质，其在医学上的应用，已是众所皆知。20世纪80年代，发现硝酸甘油治疗心绞痛的 的分子机制是一种气体分子一氧化氮（NO）。该种气体起源于血管内皮细胞，有鸟苷酸环化酶的活化而产生， 是导致血管扩张的分子形式。 从那时起，对医用气体的研究取得快速进展。生物体内产生的产生血红素的一氧化碳和产生硫酸甲酯的分解产生的硫化氢具有很强的抗氧化作用，被认为是非常重要的神经递质。这3种气体分子（即一氧化氮、一氧化碳和硫化氢）被称为体内的气体信号分子（表1）。NO的研究者因此被授予诺贝尔奖。
NO已经在临床上用于治疗心脏和肺部疾病。临床研究已开始在肾移植和严重呼吸衰竭患者中进行一氧化碳治疗，以及对肾功能不全患者和经历过冠状动脉旁路术的患者进行氢硫化物治疗。
然而，长期以来，人们难以相信氢分子即氢气（H2）可以发挥任何生物效应，因为与这些其他气体相比，氢气是非自由基、非反应性、非极性、高度可扩散的中性气体，不太可能具有特异性结合位点，或与特异性受体发挥特异性相互作用

治疗性气体

NOS：一氧化氮合成酶; XO：黄嘌呤氧化酶; HO：血红素加氧酶; CBS：胱硫醚β-合成酶; CSE：胱硫醚γ-裂解酶

但是从演化的角度来看，氢可能会产生生物效应并不奇怪。除了它在宇宙起源中的作用外，氢还参与了生命的起源，并且在真核生物的进化过程中发挥了积极的作用。在数百万年的进化过程中，植物和动物与产氢细菌发生互惠关系，导致真核系统中氢分子保持一定基础水平。 有理由推断，真核生物在数百万年的进化过程中可能保存了对氢分子的敏感性和依赖性。
迄今，业已发现H2 能预防和治疗体内各个器官，包括脑、心、肾、胰、肺、肝和软组织的疾病，对危害人类最大的癌症，也具有控制作用。
自由基和活性氧
癌症是一包含起始、促进和进展多阶段过程。氧化应激与该过程的所有三个阶段都有关。通过诱导细胞信号转导途径，活性氧（ROS）可以促进肿瘤细胞增殖、存活和细胞迁移。
（一）什么是自由基和活性氧（ROS）？ 
自由基是具有不成对价电子的原子、分子或离子。因为电子喜欢成对地“行进”或需要伴侣，如果化学物本身只有一个电子， 这将使这个化学实体具有很强的反应性，并且很容易从周围环境中“窃取”电子（图1）。由于这种特性，自由基具有很强的反应性。

图1.  自由基形成

活性氧（ROS）物质是在其最外层电子壳中具有单个不成对电子的自由基、离子或分子。 ROS可分为两类：游离氧自由基和非自由基ROS（表2），后者是可以转化为自由基或起氧化剂的作用的分子。超氧化物、过氧化氢和羟基自由基是癌症中研究最多的ROS。

表2  活性氧的种类

（二）活性氧的产生

ROS通过多种机制在细胞内产生，取决于细胞和组织类型。“专业”ROS生产者有细胞膜、线粒体、过氧化物酶体和内质网中的NADPH氧化酶（NOX）复合物。在线粒体中，ROS是氧化磷酸化的副产物。 电子传递链包括线粒体内膜上的复合物I-IV和ATP合酶。 在复合物I和III处产生超氧化物并释放到膜间空间（约80％的产生的超氧化物）或线粒体基质（约20％）。通过线粒体外膜的通透性转换孔（MPTP），超氧化物渗漏到细胞质中。 超氧化物在线粒体基质（通过MnSOD）或细胞浆（通过Cu / ZnSOD）中被歧化为H2O2。H2O2 是一种真正的第二信使，具有高度可扩散性（图2）。

图2  ROS产生和解毒的主要机制：超氧化物(O2•−)自由基在线粒体的内膜处产生，作为电子传递链的副产物，然后通过线粒体通透性转换孔（MPTP）释放到线粒体基质或胞质溶胶中。生长因子受体（GF-R）或细胞因子受体可激活NADPH氧化酶（NOX），也产生超氧化物。超氧化物歧化酶（ SOD），例如线粒体基质中的MnSOD或细胞浆中的Cu / ZnSOD，能将超氧化物还原成 H2O2。细胞浆中抗氧化系统，包括过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶（GPX）和过氧化物酶（Prx），还原过氧化氢为水。过氧化氢和超氧化物参与细胞信号传导，但也可形成羟基自由基(•OH)。羟基自由基在Fenton反应中由O2•− 和 H2O2 产生，对蛋白质、DNA和脂质具有破坏性作用
言:
除线粒体外，过氧化物酶体是细胞ROS产生的其他主要部位。 在这些呼吸性细胞器中，超氧化物和H2O2通过过氧化物酶体基质和过氧化物酶体膜中的黄嘌呤氧化酶产生。
 
外源性ROS可以由污染物、烟草、烟雾、药物、异生素、紫外线或辐射产生。电离辐射与水的相互作用，产生破坏性中间体，这一过程称为辐射分解。 由于水占人体的55％-60％，因此在电离辐射的存在下，辐射分解的可能性非常高。 在该过程中，水失去电子并变得具有高度反应性。然后通过三步链反应，水依次转化为羟基自由基(•OH )、过氧化氢（H2O2 ）、超氧自由基（O2•− ），最终生成氧气（O2）。 
 
缺氧是ROS生成的促进因素：缺氧通过线粒体电子传递链（ETC）触发ROS产生，抑制脯氨酰羟化酶（PHD），激活缺氧诱导因子1（HIF1）和HIF2 ；（2）缺氧还通过ROS依赖性信号传导激活其他反应和转录因子；（3）癌基因包括KRAS和MYC，可以进一步推动ROS的产生；（4）线粒体DNA（mtDNA）突变 - 或核DNA编码的蛋白质可以增加线粒体ROS的产生（图3）。 

图3  缺氧激活线粒体产生ROS和氧化信号，驱动肿瘤细胞表型：缺氧通过线粒体电子传递链（ETC）触发ROS产生，抑制脯氨酰羟化酶（PHD），激活缺氧诱导因子1（HIF1）和HIF2 。 癌基因包括KRAS和MYC，可以进一步推动ROS的产生。线粒体DNA（mtDNA）突变 - 或核DNA编码的蛋白质可以增加线粒体ROS的产生
AP1，激活蛋白1; IMS，膜间隙; NF-κB，核因子-κB; NRF2，核呼吸因子2
 
活性氮物质（RNS）由含氮氧化剂如一氧化氮（NO）形成。线粒体呼吸链可在低氧条件下产生RNS，而RNS可进一步产生其他活性物质，现在已知连续性细胞ROS和RNS产生是多种因素的结果，包括致癌物暴露、炎症和线粒体呼吸。

（三）活性氧的生理作用

在生物学背景下，ROS是氧的正常代谢的天然副产物，在细胞信号传导和体内平衡中起重要作用。 在内源性代谢反应中，嗜氧细胞产生ROS，包括O2•−、H2O2和•OH，参与控制着细胞功能，包括调节细胞凋亡（程序性细胞死亡）、诱导宿主防御基因和离子转运系统、参与伤口修复和血液稳态。血小板释放ROS，促使血小板募集到损伤部位。 ROS还通过募集白细胞，参与免疫调节。

在环境压力（例如，辐射、紫外线或化学物暴露）下，ROS水平会急剧增加，并可能导致细胞结构损害。 这被称为氧化应激，对细胞的有害影响表现为——
· 细胞核内DNA或RNA损伤
· 线粒体DNA损伤
· 脂质中多不饱和脂肪酸的氧化（脂质过氧化）
· 蛋白质中氨基酸的氧化
· 通过辅因子的氧化，氧化灭活特定的酶

选择性抗氧化
分子氢是线粒体中氧化应激的理想抗氧化分子，由于其体积小，它是极少数能够到达线粒体内部的抗氧化分子之一。 H2直接保护暴露于活性氧的线粒体。
H2 是一抗氧化剂，在许多生物活性过程中发挥作用。体内最强大和毒性的氧化剂有•OH和ONOO−，能作用于核酸、脂质和蛋白质，引起DNA受损、脂质过氧化和蛋白变性。H2是这两种氧化剂的特异性清除剂。所幸是，H2 对在体内具有正常生理功能的活性氧无作用。
业已证明，H2 在人类各种疾病和动物模型时，H2可减低各种氧化应激标志物的表达，这些标志物包括髓过氧化物酶、丙二醛、8-羟基 - 脱氧鸟苷8-OHdG、8-异前列腺素F2a和硫代巴比妥酸反应物质。 近来还报告H2 的抗氧化作用能改变植物的某些病理过程，有助水果保鲜。 
氢抗氧化损伤的另一种机制是通过NRF2 途径。H2 活化Nrf2-Keap1系统，随后诱导抗氧化剂应答元件（ARE）途径，进而导致产生各种细胞保护性蛋白质，如谷胱甘肽、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶以及血红素-1加氧酶等生成。
 
最初认为氢的有益作用是由于氢选择性中和细胞毒性羟基自由基所致。然而，虽然H2减少了•OH自由基，它可能不是通过直接清除，也不能完全解释氢的所有良好作用。例如，在类风湿性关节炎的双盲安慰剂对照试验中，氢具有残留效应，停止给氢后4周，疾病症状仍持续改善。许多细胞研究还表明，在氢气从体系中消失之后很长时间内，对施加的攻击（例如毒素，辐射，损伤等）仍具有抵抗力。因此，H2 的良好作用可能还有其他机制。
（二）抗炎症作用
2001年有一研究发现，吸入高浓度H2 治愈了寄生虫引起的肝脏炎症，从而第一个证明H2 具有抗炎症特性。进一步在各种损伤模型发现H2 有抗炎症作用，通过下调各种促炎症性和炎症性细胞因子，如白介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)、细胞内细胞黏附分子-1 、高迁移率组框－1（HMGB-1）、 核因子 kappa B (NF-κB) 和前列腺素 E2 等，抑制炎症性损伤。在败血症小鼠，H2 能提高生存率，减少器官损伤，主要由于下调早期或后期血清和组织内促炎症性细胞因子。有资料显示，肠道内生成的H2 也具有抑制炎症的效能。
（三）抗凋亡
H2 能上调或下调与凋亡相关的因子，实施抗凋亡作用。已知H2能抑制促凋亡因子、B细胞淋巴瘤－2相关性X蛋白、caspase－3、caspase－8和－2 的表达，上调抗凋亡因子、B细胞淋巴瘤－2和B细胞淋巴瘤－特大（B-cell lymphoma-2 and B-cell lymphoma-extra large ）表达。H2 尚能调节特殊通路内和之间的信号传导，抑制凋亡。有人还发现，H2的神经保护作用，至少部分地与神经元内抗凋亡蛋白激酶B激活有关。 
（四）改变基因表达
H2 在体内可诱导各种基因表达，例如NF-κB 、 c-Jun N- 末端激酶(JNK) 、增生细胞核抗原、血管内皮生长因子 (VEGF) 、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和肌酐激酶。这些分子中某些可被H2 再次调节，某些是直接H2 的靶标。在正常大鼠肝脏中，H2被发现对个体基因的表达影响不大，但上调氧化还原相关基因。 H2的抗炎和抗凋亡特性可以通过调节促炎症和炎症性细胞因子的表达以及凋亡相关因子来实现。
氢调节表观遗传效应的分子，而间接影响基因表达。分子氢可以：
· 阻碍NF-kB的释放
· 减少TNFα
· 减少过量的一氧化氮
· 清除过氧亚硝酸盐
 
除了潜在的羟基自由基清除和/或Nrf2途径的激活外，氢可以通过细胞调节作用改善氧化应激并减少自由基的形成，例如下调NADPH氧化酶系统。氢的各种细胞调节作用参与氢的抗炎、抗过敏和抗肥胖作用。氢能下调促炎细胞因子（例如白介素－1（IL-1）、IL-6、IL-8等），减少TNF-α、NF-κB、NFAT、NLRP3 和HMGB1 等炎症介质的激活。另外，通过增加FGF21、PGC-1a 、PPARα等的表达，氢能减少肥胖，改善代谢。 其他能受H2影响或调节的第二信使分子或转录因子还有生长素释放肽、JNK-1 、ERK1 / 2 、PKC 、GSK 、TXNIP 、STAT3 、ASK1 、MEK 、SIRT1 等等。已知超过200种生物分子，包括超过1000种基因表达，可被氢气改变。
H2可能影响多个信号通路以发挥广泛的作用，这些通路之间的交互联络又可能影响H2治疗结果（图8）。 作为气体信号调节剂，H2的作用涉及信号分子网络，H2在这种环境中的到底发挥何种作用，值得进一步研究。

图8  氢可以减少羟自由基，增加内源性抗氧化剂, 发挥抗氧化应激作用 
 
有关氢调节信号转导、基因表达和蛋白磷酸化的确切机制仍在研究中。 《科学报道》（Sci Rep）最近发表的一篇文章指出，氢能修饰细胞膜中的脂质过氧化反应，这可能是其实现各种细胞调节作用的机制之一。 微阵列分析（comprehensive microarray analysis）确定，在生物相关浓度的培养细胞中，氢能抑制自由基链反应依赖性过氧化作用并恢复Ca2 +诱导的基因表达。
 
（五）免疫保护作用
有研究表明，氢能保护免疫系统免受辐射损害。在接受辐射的小鼠实验中， H2预处理组的脾脏指数较高，脾脏结构损伤较轻， 辐射诱导的细胞凋亡受抑和促凋亡蛋白下调， CD4 +和CD8 + T细胞的绝对数量和百分比相对保持正常，TGF-β1的水平显着下降，提示H2 可纠正辐射诱导的T细胞失衡。研究显示，辐射引起的免疫异常与ROS有关，提示H2 的免疫调节作用可能通过消除ROS实现。 
 
氢分子的控癌作用
 
H2可以作为抗肿瘤剂。早先有人用中性pH H2富集的电解（NHE）水作为抗氧化剂，发现能抵抗ROS，抑制肿瘤细胞增殖和侵袭。 氢气水优先抑制人舌癌细胞的克隆生长，抑制人纤维肉瘤细胞侵袭  。据报道，在H2 环境下，在Ehrlich腹水肿瘤中观察到细胞数量减少、细胞皱缩、细胞凋亡、细胞变形和膜表面的微绒毛。
 
实验研究证明，H2 能控制或抑制癌症的启动、进展和转移，其机制主要以ROS为中心，通过对ROS的中和和拮抗，发挥以下作用——
 
· ROS引起DNA基因突变和结构改变，启动癌症发生。H2中和ROS，预防癌症发生；
· ROS引起异常基因表达，刺激细胞内和细胞外环境的信号传导途径，干扰信使系统，促进癌细胞增殖。H2 中和ROS，减缓癌症进展；
· ROS 诱发慢性炎症，上调趋化因子和趋化因子， 促进肿瘤的侵袭。ROS下调各种促炎症性和炎症性细胞因子；
· ROS损伤线粒体，细胞有氧呼吸发生障碍，导致 线粒体DNA（mtDNA）突变，促发癌症发展。H2 很易进入线粒体，对线粒体发挥保护作用；
· ROS 通过降低细胞对细胞外基质的粘附性、增加血管通透性 ROS、促进肿瘤血管生成、诱导肿瘤细胞基质金属蛋白酶的分泌、激活血红素加氧酶-1， 促进肿瘤细胞的运动和转移。H2消除ROS的上述作用
· ROS助长癌干细胞生存和对药物耐受。 H2可阻抑ROS的上述作用。
· ROS 能破坏免疫系统的平衡。H2 能纠正致癌因素引起的免疫失调。
· ROS  的氧化活性及其促发的慢性炎症，可干扰和全身各系统的功能。H2 能上调或下调与凋亡相关的因子，抑制凋亡，发挥细胞保护作用。这对于改善癌症患者的 全身状态和维护各系统功能，减轻治疗的不良反应，具有极大意义。
辩证法认为，合理的就是合乎理性的，合乎理性的就是现实的。ROS和H2 是天生的一对冤家，H2 是天生的ROS克星。既然ROS 对癌症发生、发展和转移均有启动和促进作用，那么H2 用于癌症的预防和治疗，将是合乎逻辑和天生合理的。
结语
氧化应激是许多常见疾病，包括癌症的主要原因，比其他自由基清除剂相比，氢分子具有独特优势：（1）氢可透过细胞膜，可以靶向细胞器，包括线粒体和细胞核，这是ROS生成的主要站点； （2）氢专门淬灭有害的ROS，如•OH和过氧亚硝酸盐（ ONOO−），同时保持参与代谢氧化还原反应的无害ROS，如氧气（O2）、过氧化氢(H2O2）和硝酸氧化物（NO）; （3）氢气易于获得，可被氧化，生成对我们身体安全而有益的水。
总体而言，H2通过在无细胞反应中与强活性氧物质反应，来降低与生活方式和环境相关的氧化应激的风险。对于氧化应激相关性癌症，氢分子从癌症发生、发展和进展，均有抑制作用，适用于——
· 在癌症发生的高危人群（例如乙肝病毒、人类乳头瘤病毒、EB病毒、幽门螺杆菌感染，长期吸烟史，长期接受辐射），H2 可预防癌症发生，是为“一级预防”；
· 在接受常规治疗（手术、消融、放疗和化疗）前的癌症患者，预先使用H2 ，可作为“新辅助治疗”，为进一步治疗创造条件；
· 在接受常规治疗（手术、消融、放疗和化疗）后的癌症患者，H2 可作为辅助治疗，消除/调控可能存在的残存癌肿；
· 在接受了成功治疗的癌症患者，H2 可用于预防复发和转移，是为“三级预防”;
· 常规治疗失败，或因高龄、体质差等原因，不能接受或拒绝常规治疗的晚期癌症患者，可以试用吸氢治疗
氢分子对癌症作用的研究尚在发展中。 有关H2 的生物学效应、药代动力学、外源性H2和内源性H2的关系，虽然有待进一步阐明，但临床的检验似乎更为重要。现有的H2 让癌症患者获得显著改善甚至“痊愈”的事实，已经让从事氢分子学基础研究的专家兴奋不已。
相信不远的未来，这种从最便宜最易得的水获取的H2 ，一定会在癌症防治的整个系统中，发挥无可取代的作用。